方法优势
辣椒酱和番茄酱样品经正己烷提取后，然后使用ProElut SDH 苏丹红检测固相萃取柱进行净化，高效液相色谱法检测。该方法参考国标方法进行样品提取，净化过程使用商品化的苏丹红检测固相萃取柱，无需按照国标方法进行层析柱的填装和中性氧化铝的活度调整，避免了中性氧化铝活度容易受环境影响而引起苏丹红回收率不稳定的弊端，使用ProElut SDH 苏丹红检测固相萃取柱重现性和回收率结果更加稳定可靠。方法检出限是1 μg /kg，优于国标GB/T 19681-2005要求检出限10 μg /kg。
以下为详细解决方案，敬请参考！
1、适用范围
本方案适用于辣椒酱和番茄酱等中苏丹红Ⅰ、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ和苏丹红Ⅳ的检测，方法检出限是1 μg /kg。
2、提取
(1) 取5.0 g样品，加入20 mL正己烷混合，振荡5 min，超声提取5 min，8000 rpm下离心2 min，收集上清液
(2) 将下层残留物用20 mL正己烷按照步骤(1)重复提取一次，合并两次上清液；
(3) 将上清液在40℃水浴条件下，减压蒸至近干，再加入5 mL正己烷混匀，待净化。
3、净化——ProElut SDH 6 mL（Cat.#65909）
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a活 化： |
5 mL正己烷活化； |
|
b上 样： |
加入待净化液，弃去流出液； |
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c淋 洗： |
依次加入5 mL正己烷，5 mL 1%乙酸乙酯正己烷，弃去流出液； |
|
d洗 脱： |
加入10 mL 30%乙酸乙酯正己烷，收集流出液； |
|
e重新溶解： |
将洗脱液在40 ℃下减压蒸馏近干，用40%甲基叔丁基醚正己烷溶液定容至1 mL，供HPLC分析。 |
4、色谱条件
色谱柱：Diamonsil C18(2), 250 mm × 4.6 mm, 5 μm（Cat# 99603）
流 速：1.0 mL/min
进样量：20 μL
柱 温：40 ℃
检测器：PDA 518 nm
流动相：A：0. 2% 磷酸水溶液 B：乙腈
梯度设置
|
时间/Min. |
0 |
18 |
20 |
30 |
30.1 |
40 |
|
A（%） |
12 |
12 |
0 |
0 |
12 |
12 |
|
B（%） |
88 |
88 |
100 |
100 |
88 |
88 |
5、添加回收结果
番茄酱中苏丹红的HPLC检测添加回收结果
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分析物 |
添加水平(mg/kg) |
回收率(%) |
|
苏丹红Ⅰ |
0.1 |
92.50 |
|
苏丹红Ⅱ |
0.1 |
95.52 |
|
苏丹红Ⅲ |
0.1 |
92.16 |
|
苏丹红Ⅳ |
0.1 |
91.47 |
辣椒酱中苏丹红的HPLC检测添加回收结果
|
分析物 |
添加水平(mg/kg) |
回收率(%) |
|
苏丹红Ⅰ |
0.1 |
91.06 |
|
苏丹红Ⅱ |
0.1 |
92.27 |
|
苏丹红Ⅲ |
0.1 |
89.13 |
|
苏丹红Ⅳ |
0.1 |
90.37 |
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